Вплив міогенних стовбурових клітин на перебіг запального процесу в щурів із гострим пародонтитом

Г.Т. Бігуляк; І.М.  Кліщ

Резюме. Захворювання пародонта є однією з актуальних проблем у сучасній стоматології та за частотою посідають друге місце після карієсу. Сучасний рівень знань дозволяє розглядати етіопатогенез захворювань пародонта як мультифакторну модель, що включає наявність мікробної інвазії (бактерійні пародонтопатогени), неадекватну захисну реакцію імунної системи або її відсутність, вплив негативних місцевих факторів ротової порожнини. Мета дослідження – вивчити вплив стовбурових клітин на перебіг оксигензалежних процесів за умов експериментального пародонтиту. Матеріали і методи. Дослідження проводили на білих безпородних щурах-самцях масою тіла 180– 200 г. Пародонтит викликали уведенням ліпополісахариду в тканини ясен по 40 мікролітрів (1 мг/мл) через день протягом 14-ти діб. Через 1; 7; 14 і 21-шу доби після останнього уведення ліпополісахариду (ЛПС) щурів декапітували під тіопенталовим наркозом (50 мг/кг). Контролем слугував матеріал від інтактних тварин. Результати. Отримували міогенні стовбурові клітини (МСК) у вагітних самок орієнтовно на 21–24-ту добу вагітності. Для отримання життєздатних МСК використовували ферментний метод. Культивування здійснювали в СО2-інкубаторі за температури 37 оС та концентрації СО2 – 5 %. Стовбурові клітини вводили щурам в ділянку ясен разовою ін’єкцією з розрахунку 1 млн клітин на 1 кг маси тіла. Для максимального збереження життєздатності клітин введення МСК виконували протягом 30 хв після отримання суспензії. Продукцію активних форм кисню (АФК) визначали методом проточної цитофлуориметрії. Рівень гідропероксидів ліпідів (ГПЛ), вміст ТБК-активних продуктів (ТБП) і основ Шиффа (ОШ) визначали за загальноприйнятими спектрофотометричними методиками. Функціональну активність нейтрофілів оцінювали за допомогою спонтанного НСТ-тесту (сНСТ-тест). Розраховували також показник резерву (ПР) за формулою іНСТ/сНСТ, а також коефіцієнт метаболічної активації нейтрофілів (Какт) за формулою: іНСТ – сНСТ/іНСТ. Отримані цифрові дані обробляли методом варіаційної статистики. Визначення достовірності відмінностей порівнюваних параметрів між різними вибірками проводили з використанням t-критерію Стьюдента (при нормальному розподілі результатів) чи Манна – Уїтні (у випадку розподілу, що не був нормальним). Висновки. Встановлено, що застосування міогенних стовбурових клітин з метою корекції гострого пародонтиту приводить до зменшення активності пероксидного окиснення ліпідів, що зумовлює зменшення ознак запалення в пародонті. Запальний процес, що перебігає у пародонті щурів за умов корекції, характеризується більш низькими показниками сНСТ-тесту та іНСТ-тесту, порівняно з тваринами, яким корекцію не проводили. Зниження метаболічних і оксидативних процесів в осередку ушкодження при гіпотиреозі супроводжується зниженням активності оксидативних процесів, що зумовлює зменшення інтенсивності ушкодження тканин у щурів із гострим пародонтитом

гострий пародонтит, запальний процес, міогенні стовбурові клітини

[1] Заболотний Т. Д. Запальні захворювання паро-донта / Т. Д. Заболотний, А. В. Борисенко, Т. І. Пупін. – Львів : ГалДент, 2013. – 205 с.

[2] Генералізований пародонтит / [Т. Д. Заболотний, А. В. Борисенко, А. В. Марков та ін.]. – Львів : Гал Дент, 2011. – 240 с.

[3] Дерейко Л. В. Взаємозв’язок між пародонтитом і загальним станом здоров’я / Л. В. Дерейко, В. В. Плє-шакова // Імплантологія. Пародонтологія. Остеологія. – 2010. – No 2. – С. 76–84.

[4] Годована О. І. Захворювання пародонту (гінгівіт, пародонти, пародонтоз) / О. І. Годована. – Львів ; Тернопіль : Джура, 2009. – 200 с.

[5] Астахова В. С. Определение регенераторного потенциала костной ткани пародонта / В. С. Астахова, Л. М. Панченко, О. Н. Романенко // Вісник стоматології. – 2001. – No 4. – С. 75–79.

[6] Грудянов А. И. Стволовые клетки и возможности их применения в пародонтологии = Stem cells and possibilities of their application in parodontology / А. И. Грудянов, В. Ю. Сысоева, Ю. В. Терновой // Стоматология. – 2012. – Т. 91, No 1. – С. 71–75.

[7] Бутенко Г. М. Регенеративна медицина і стовбуро-ві клітини – проблеми і рішення / Г. М. Бутенко, В. М. Ки-рик // Журн. НАМН України : науковий журнал Президії НАМН України. – 2011. – Т. 17, No 1. – С. 62–66.

[8] Золотухина Е. Л. Стволовые клетки и перспективы их применения в стоматологии и челюстнолицевой хирургии / Е. Л. Золотухина // Молодой ученый. – 2014. –Т. 9, No 6. – С. 145–147.

[9] Патент на корисну модель No 65771: Мачоган В. Р., Авдєєв О. В. / Спосіб моделювання пародонтиту // Бюле-тень No 23. – 2011 р.

[10] Колесова О. Е. Перексидное окисление липидов и методы определения продуктов липопероксидации в биологических средах / О. Е. Колесова, А. А. Маркин, Т. Н. Федорова // Лаб. дело. –1984. – No 9. – С. 540–546.

[11] Диагностическая ценность лейкоцитарных тестов. II. Определение биоцидности лейкоцитов : метод. рекоменд. / под ред. Д. Н. Маянского. – Новосибирск, 1996. – 32 c.

[12] Лабораторні методи дослідження у біології, тваринництві і ветеринарній медицині: довідник / [В. В. Влізло, Р. С. Федорук, І. Б. Ратич та ін.]. – Львів : СПОЛОМ, 2012. – 764 с.

[13] Лапач С.Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Excel / С.Н. Лапач, А.В. Чубенко, П.Н. Бабич. – К.: Морион, 2000. –320 с.

[14] Stem cell therapy for craniofacial bone regenera-tion: A randomized, controlled feasibility trial / D. Kaigler, G. Pagni, Ch. H. Park [et al.] //Cell Transplant. – 2013. – Vol. 22(5). – P. 767–777.